當前位置:上海古朵生物科技有限公司>>技術文章>>你能區分什么時候需要構建穩轉株嗎?
實驗室里大家都埋頭做實驗,可為什么老板每次都罵我們,你都快 30 的人了這也不會那也不會,白長這么大了,栽培了你那么多年到頭來啥也指望不上。對此,我深感委屈,那個細胞我養了那么久,它還是那樣衣來伸手飯來張口,我有怪過誰么?
首先,這么大的細胞了,除了要自己學會傳代之外,鄙人對你們還有更高的要求,你該學會自己做實驗了。
非常好,你能區分什么時候需要構建穩轉株嗎?
細胞:需要構建穩轉株的,有這些類型:
1. 長期在目的細胞中研究基因功能;
2. 部分蛋白半衰期極長,瞬時 RNA 只能干擾表達,無法去除已經表達的目的蛋白,想要實現更好的基因干擾效果;
3. 想要實驗更,篩選拷貝數適量的細胞進行實驗研究;
4. 需要用誘導表達系統的,主要是一些致死基因或者是需要時空表達的;
5. 需要用細胞做動物實驗的,比如裸鼠成瘤等。
以下實驗就不需要構建穩定株:
1. 希望迅速觀察目的基因過表達或者干擾效果;
2. 2~4 天的瞬時表達已經可以達到具體的實驗目的,比如檢測兩個外源轉染的目的蛋白之間的相互作用;
3. 細胞個體差異對實驗結果有影響。
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