【儀器網(wǎng) 技術(shù)前沿】如果被測樣品過于昂貴或者本身就不多,只能取用很少的樣品量,無法達到實驗要求怎么辦?相信不少實驗員都碰到過這種情況,直接用普通的實驗室儀器測定,結(jié)果可能存在很大的誤差。更何況,樣品量有限,測定失敗就沒有再來一次的機會了。那么,有什么方法可以準(zhǔn)確測定微量樣品呢?配備以下“神器”就可以輕松做到!
微量樣品
微量天平解決稱量難題 提高實驗成功率
測定微量樣品的步,就是對樣品進行稱量。相比于傳統(tǒng)天平,電子天平可以測定出樣品的質(zhì)量。比如常量電子天平的稱量在100到200g,半微量天平在20到100g,微量天平可以達到3到50g。那么,低于3g的樣品如何測定呢?現(xiàn)在儀器廠商已經(jīng)推出了一種超微量電子天平,可以測定2到5g的微量樣品。由于微量樣品受到其他因素的影響比較大,因此,超微量電子天平往往會注重誤差的規(guī)避,比如對靜電產(chǎn)生的稱量誤差進行測量,配備主動熱控制系統(tǒng)提高稱量穩(wěn)定性。
不過,即便儀器廠商設(shè)計的超微量天平再精密,實驗人員在使用時也要頗為用心。作為一種靈敏度很高的儀器設(shè)備,環(huán)境因素或者人為干預(yù)產(chǎn)生的輕微干擾也會對超微量天平的測量穩(wěn)定性造成嚴(yán)重影響。因此,在使用時要盡可能避免氣流、灰塵、溫度、振動等因素的影響,遠(yuǎn)離窗門、通風(fēng)口,保持環(huán)境溫濕度的穩(wěn)定。開機時還可以預(yù)熱一定時間,使其與環(huán)境溫度適應(yīng)。當(dāng)然,測定微量樣品時也不可以隨隨便便用手操作,必須使用鑷子來稱取。
與普通樣品一致,微量樣品在正式開始測定之前也必須經(jīng)過前處理。根據(jù)樣品的形態(tài),樣品前處理技術(shù)可以分為固體、液體及氣體的前處理技術(shù)。固相萃取技術(shù)可以利用
液相色譜分離原理,保留待測樣品中需要測定的組分,隨后沖洗雜質(zhì),達到快速分離凈化與濃縮的目的。近年來,科學(xué)界針對微量樣品開發(fā)出了固相微萃取技術(shù),集“采樣、萃取、濃縮、進樣”于一體,與
氣相色譜或者液相色譜聯(lián)用進行樣品前處理。相比于固相萃取技術(shù),該新技術(shù)樣品用量僅為幾毫升到幾十毫升,可以很好地滿足微量樣品的前處理要求。
如何測定微量樣品?這些科學(xué)儀器大有可為
針對微量樣品的分析測定項目有很多,相應(yīng)的科學(xué)儀器類型也多種多樣。以pH值的測量為例,普通的pH電極難以準(zhǔn)確測定微量樣品,原因在于電極玻璃膜、液絡(luò)部和溫度三大因素。首先,電極玻璃膜在測定過程中必須完全被樣品覆蓋,以免部分玻璃膜暴露在空氣中,影響測量結(jié)果。然而,微量樣品往往無法完全覆蓋,這就需要設(shè)計足夠小的玻璃膜。其次,液絡(luò)部位于玻璃膜上方,同樣需要接觸到微量樣品,然而標(biāo)準(zhǔn)尺寸的pH電極無法滿足這一條件。后,實驗過程中溫度因素會起到不小的影響,需要pH電極與微量樣品之間達到平衡。樣品過少的情況下,實驗人員很容易會把電極的溫度誤認(rèn)為樣品溫度。想要解決這些問題,實驗室必須配備各方面相符合的pH微量電極,無需大量樣品即可獲得準(zhǔn)確的pH測量結(jié)果。
了解了pH的測定方法,再來思考一下微量樣品能否采用分光光度計進行測量。答案是,采用超微量分光光度計。有別于傳統(tǒng)分光光度計,超微量分光光度計所需的樣品量很少,自身體積也很小。部分產(chǎn)品只需要一滴樣品,無需進一步稀釋,就可以輕松測量。它甚至不需要比色皿,用移液槍就可以直接把樣品滴加在檢測平臺上,不容易產(chǎn)生交叉污染。近年來,超微量分光光度計已經(jīng)成為生物實驗室的新寵,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)實驗室蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)等領(lǐng)域。目前,賽默飛、德國伯赫、梅特勒-托利多等品牌的超微量分光光度計比較受市場歡迎。
隨著現(xiàn)代化科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,以及越來越多領(lǐng)域需求的快速上升,國內(nèi)外掀起了科學(xué)儀器小型化的研究熱潮。無論是外在的體積、質(zhì)量,還是內(nèi)在的精密性、可靠性,小型甚至微型儀器都可以滿足用戶的需求。與此同時,微量樣品的處理和測定技術(shù)也備受重視,借著儀器小型化的春風(fēng)扶搖而上,相信未來會有更多技術(shù)難題能夠迎刃而解。
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