【儀器網(wǎng) 珀金埃爾默】 細胞遷移,指的是細胞在接收到遷移信號或感受到某些物質(zhì)的濃度梯度后而產(chǎn)生的移動。移動過程中,細胞不斷重復(fù)著向前方伸出突觸/偽足,然后牽拉后方胞體的循環(huán)過程。細胞骨架和其結(jié)合蛋白,還有細胞間質(zhì)是這個過程的物質(zhì)基礎(chǔ),另外還有多種物質(zhì)會對之進行精密調(diào)節(jié)。細胞的運動有很多種,有生理性運動,如發(fā)育過程中的細胞運動,生殖細胞、干細胞的成熟過程中的位置變化。也有病理性變化,如腫瘤的遷移和侵襲。
從癌癥的產(chǎn)生到轉(zhuǎn)移,血管供給以及分裂增殖都一直是醫(yī)學和生物學研究的熱點。癌癥細胞增殖失控,短時間內(nèi)可以繁殖出大量后代,這樣首先會造成生長空間的局促和養(yǎng)分,如氧氣的緊張。這樣惡性腫瘤內(nèi)會形成一片壞死區(qū),正如上面在組織損傷里面提到的,機體會嘗試“修復(fù)”這些損傷。壞死組織會釋放出一系列促血管生成因子,如血管內(nèi)皮生長因子以及各種免疫細胞,如巨噬細胞。巨噬細胞也會釋放大量促血管生成細胞因子和生長因子。因此腫瘤的研究伴隨著復(fù)雜的細胞運動,如腫瘤細胞沿著循環(huán)系統(tǒng)的運動,血管內(nèi)皮細胞和免疫細胞進入腫瘤實體的運動。
劃痕法是經(jīng)典的細胞行為學檢測方法。在平鋪的細胞單層上劃出一條痕跡,然后清洗更換培養(yǎng)液后,細胞會從原有位置向劃痕處遷移。統(tǒng)計劃痕寬度和面積的變化就可以監(jiān)控細胞遷移的速度和細胞遷移的能力。
以前在做劃痕實驗的時候受到諸多限制:首先微孔板的孔不能太小,孔越小,槍頭越難伸進去;其次劃出的痕跡邊緣歪斜,無法形成一條直線;孔與孔之間的劃痕寬度也不均一。這給劃痕這個時間梯度的實驗帶來了很大的困擾。在多次的拍照過程中,由于劃痕寬度的差異性對于劃痕拍照位置的復(fù)位要求甚高。然而隨著細胞遷移的發(fā)生,細胞的原位的形態(tài)和分布也發(fā)生的動態(tài)變化。所以復(fù)位劃痕的拍照位置成為就成為了一個力氣活:既然無法準確找到,那就全部拍下;既然每個位置寬度不一,那就全部統(tǒng)計。
借助MuviCyte™長時間活細胞成像系統(tǒng)的劃痕套裝。輕輕一劃,解決全部困擾。
借助Scratcher整齊的96針,可以在96孔微孔板底面整齊的劃出寬度均一的劃痕。
借助MuviCyte™長時間活細胞成像系統(tǒng)可以盯住一個視野不停的拍。然后生成無抖動的視頻。
借助專業(yè)的劃痕分析軟件,對劃痕寬度、面積、愈合速度進行分析,可以獲取的參數(shù)包括:
劃痕面積
劃痕的覆蓋度
劃痕的寬度
劃痕的愈合速度
相對劃痕密度
對于原始細胞區(qū)域、原始劃痕區(qū)域、劃痕分界線、遷移后細胞的區(qū)域進行精準的劃分,保證分析結(jié)果的精確。輕松的完成整個實驗,再也不用熬夜拍劃痕了。
MuviCyte™已于2020年1月1日全新上線,借助它的多熒光通道和多種物鏡選擇,可以完成多種復(fù)雜的復(fù)雜細胞模型的拍攝和觀察,在腫瘤免疫、干細胞等多個領(lǐng)域都有重要的應(yīng)用。
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