大鼠白細胞介素6（IL-6）ELISA Kit上海素爾生物科技有限公司提供，1-2個工作日發貨，提供免費代測服務，收到標本起一周內提供原始數據和zui終數據，提供ELISA各種樣本收集、處理、保存方法，歡迎您致電咨詢 大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子（TSGF）ELISA試劑盒庫存狀態，售后說明等。

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中文名稱：大鼠白細胞介素6（IL-6）ELISA Kit

英文名稱：Rat Interleukin6,IL-6 ELISA Kit

儲存溫度：：-20℃(較長時間不用時)；2-8℃(頻繁使用時)

有效期：6個月

產品供應商：上海素爾生物科技有限公司

1-2個工作日發貨，提供免費代測服務，收到標本起一周內提供原始數據和zui終數據

ELISA各種樣本收集、處理、保存方法

1. 血清標本收集、處理、保存方法：

用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本，全血標本室溫放置1－2 h或4℃過夜，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

2. 血漿標本收集、處理、保存方法：

根據樣本要求選擇EDTA或*或枸緣酸鈉作為抗凝劑，用含抗凝劑的*或離心管采集血液標本，室溫混合20 min左右，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清即為血漿。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

3. 尿液標本收集、處理、保存方法：

用干凈容器收集尿液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

4. 唾液標本收集、處理、保存方法：

用干凈離心管收集唾液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

細胞標本收集、處理、保存方法:

（1）細胞培養上清

 取細胞培養上清到干凈離心管中，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

細胞裂解液

收集細胞培養液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，棄去上清，用預冷的PBS（0.01M，PH 7.4）洗滌三次。加入適量的預冷PBS或細胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細胞。通過反復凍融，使細胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，除去細胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

6. 植物標本收集、處理、保存方法：

取適量大小組織塊（一般0.2－0.5 g），用預冷的PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4）漂洗三次，濾紙拭干水分。準確稱重，放入勻漿管中，加入4倍體積的勻漿介質（0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.4 PBS緩沖液）于勻漿管中，冰水浴條件下，剪碎組織塊，手工勻漿或機器勻漿，制成勻漿液。4℃、10000 rpm/min離心20 min，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

7. 糞便標本收集、處理、保存方法：

采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中，向離心管中加入適量PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4），攪拌均勻。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

8. 組織標本收集、處理、保存方法：

將組織樣本用PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4）沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質。將組織塊稱重，記錄后剪碎（碎塊盡量小）。將組織按一定的比例（通常組織重量：PBS體積=1：9）加入預冷的PBS緩沖液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）中勻漿，勻漿時置于冰上。吸取勻漿液到離心管中，4℃、10000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

大鼠白細胞介素6（IL-6）ELISA Kit

1．ELISA試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完， 板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，*使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

試劑盒靈敏度、精密度、穩定性

1. 靈敏度：有二層含義，1）為試劑檢出被檢物質的zui低量的能力；2）為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。 

2. 特異性：常用交叉反應率表示。其越高說明特異性越好。 

3. 精密度：ELISA試劑一般指其批內CV，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍

4. 穩定性：試劑在規定條件下能儲存的時間，一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存，定期測定其靈敏度，特異性和精密度等指標，直到其質量指標開始下降為止，通常認為37℃每穩定一天相當于4-10℃保存一個半月。 

5. 簡便性：指在不影響試劑的前三項指標的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在定性試驗中結果判斷簡單明了，定量試驗結果計算也應簡單。

6. 安全性：指試劑對操作者和環境安全無害無傳染性。 

7. 經濟性：試劑在同等質量條件下通過大規模生產或技術進步降低成本而市場價格比較合理。 

試劑評價：需要有的確證方法確證的樣品進行檢測，一般實驗室不易取得此類樣品，每新購進一次試劑評價也很麻煩。可以通過間接的回收實驗對試劑進行選擇

ELISA試劑盒常見問題及分析

問題分析

若試驗效果不好，請及時對顯色結果拍照，保留未用板條及未使用試劑，并妥善保存，然后我公司為你解決問題。同時您也可以參考以下資料：

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*個主要的參數是洗滌量。自動洗板機會分配洗滌液。如果你之前遭遇過高背景，那么不要猶豫，將洗滌量調為高，是比包被體積更高。太少的洗滌液會讓一部分分析表面洗滌不到，從而明顯增加背景。所有反應孔的洗滌量必須相同。ELISA板的制造商通常會在試劑盒的使用手冊中列出包被量。行業中通常使用的包被量是200µl。如果你的試劑盒也是這樣，那么制造商可能會建議使用300µl洗滌液進行洗滌，以便清潔整個反應孔的壁。一般來說，洗滌量越高，則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。

第二個影響洗滌效果的主要參數是洗滌循環的量。當然，洗滌次數越多，背景越低。然而，太多次的洗滌會降低信號強度，使其難以測定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復洗滌三次。不過，ELISA板的制造商會對洗滌次數提出建議。一般而言，制造商包被平板需要的洗滌次數比用戶包被的平板要少。對于用戶包被的ELISA板，必須優化洗滌次數。控制洗滌量和洗滌次數的另一種方法是加入過量的洗滌液。一般來說，96孔板的每個孔能容納330至460 µl。不過，有些自動化洗板機可設置程序，分配遠遠超出這個量的洗滌液，比如1 ml。它是如何做到的呢？其實很簡單，就是在分液的同時打開吸液功能。換句話說，隨著分液器分配更多的液體，抽吸器也將液體吸出。這種技術能增加洗滌量，但不會溢出到其他孔中。

另外，還有一些參數會影響洗滌步驟的效果。這些參數包括吸液高度和吸入位置，這兩者都能調整，以降低背景（殘留量）和差異。殘留液體中包含未結合的抗原或抗體，它們會增加背景信號。殘留量越小，殘留液體越少，轉移到下一步的干擾液體也就越少。吸液高度會明顯影響殘留量；如果洗滌吸頭與反應孔底部的距離稍大，那就會讓殘留量急劇增加。反之，如果洗滌吸頭壓著反應孔底部，那么也會使吸液效率降低，殘留量增加。目前的洗板機一般使用兩種類型的洗頭：剛性和浮動。浮動洗頭中的吸頭可在洗滌過程中自由上下移動，而剛性洗頭則固定在適當的位置。使用剛性洗頭的洗滌操作在優化起來更為復雜，因為你需要非常仔細地調整吸液高度。如果你們實驗室使用幾種不同的板，那可能會很耗時。在使用浮動洗頭時，吸頭會降到反應孔的底部。調整高度就不是很重要，因此洗頭會下降到底部。抽吸的位置也對殘留量有著重要影響；如果每個孔只使用一個抽吸點（這很常見，因為更快），那么抽吸的位置需要優化。*的位置取決于洗頭的性狀，但它幾乎不在反應孔的中間，即使這是所有洗頭zui常見的默認位置。一般來說，*位置在孔中間與孔壁之間的某處。反應孔的形狀也會影響殘留量。C形底（平底圓角）的微孔板一般會比那些平底尖角的微孔板殘留量更低。如果沒有自動洗板機，采用手工洗滌，那么也需要注意幾點。使用8道或12道微量移液器，采用倒吸的方法進行洗滌；不同廠家的洗液不宜相互混用。洗板時需保證微孔板平放，將洗滌液注滿各孔，但盡量避免漏液溢液，以每孔300 µl為宜；板洗次數一般為3次，要保證洗板的浸泡時間，每次浸泡時間一般為30-60 秒；盡量減少洗液殘留量，*每次洗板后進行拍板，并及時更換吸水紙，避免吸水紙的碎屑粘到反應孔內。

大鼠白細胞介素6（IL-6）ELISA Kit看起來很簡單，但是在實際操作過程中，也不能掉以輕心，還是應該仔細檢查洗滌步驟，才能獲得準確的結果。