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犬透明質酸酶2(HAase2)ELISA試劑盒說明書

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犬透明質酸酶2(HAase2)ELISA試劑盒說明書由上海古朵生物提供,別名:犬透明質酸酶2(HAase2)ELISA Kit,適用范圍:僅用于科研實驗,禁用于臨床。性能:敏感性高,特異性強,重復性。規格:48t/96t,保存:2-8℃,有效期:6個月

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上海古朵生物提供犬透明質酸酶2(HAase2)ELISA試劑盒說明書,詳細介紹本品的信息說明,操作步驟及其他咨訊,本司產品滿足于用戶需求,現貨供應:ELISA試劑盒,動物血清,標準品,對照品,培養基,抗體,抗原,染色液,溶液,緩沖液,實驗耗材,生化試劑,化學試劑及其他試劑,歡迎選購!

<strong><strong><strong>犬透明質酸酶2(HAase2)ELISA試劑盒說明書</strong></strong></strong>

犬透明質酸酶2(HAase2)ELISA試劑盒說明書

 

【信息說明】

中文名:犬透明質酸酶2(HAase2)ELISA試劑盒

別名:犬透明質酸酶2(HAase2)ELISA Kit

供應商:上海古朵

規格:48t/96t

保存:2~8℃

有效期:6個月

樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。

用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。

種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。

檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

 

【樣本處理】

1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

2、血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

3、細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

4、組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

5、培養細胞:檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

 

【操作步驟】

1、編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2 孔、陽性對照2 孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)。

2、加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4、配液:將20倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用。

5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7、顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘。

8、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

9、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

 

【注意事項】

1、試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

2、實驗中不用的試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

3、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

4、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

5、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

6、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

7、洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

8、底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

9、加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

10、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

 

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標簽:犬透明質酸酶2(HAase2)ELISA試劑盒說明書      犬透明質酸酶2(HAase2)ELISA試劑盒


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