X-gal溶液 (20mg/ml)
英文名稱
X-gal(20mg/ml)
規(guī)格
1ml ; 5ml
儲(chǔ)存條件
-20℃，避光，有效期1年
單位
瓶

X-gal溶液 (20mg/ml)產(chǎn)品說(shuō)明： 

IPTG 為安慰性誘導(dǎo)物，X-gal 為生色底物，二者共同用于藍(lán)白斑篩選。IPTG 可誘導(dǎo)載體 Lac 操縱子 DNA 區(qū)段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段，該片段可與宿主細(xì)胞編碼的缺陷型β-半乳糖苷酶實(shí)現(xiàn)基因內(nèi)互補(bǔ)(α互補(bǔ))。實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ)的細(xì)菌鋪在含有 X-gal 生色底物的培養(yǎng)基上，可形成藍(lán)色菌落。外源DNA 插入質(zhì)粒的多克隆位點(diǎn)后可破壞α互補(bǔ)作用，將產(chǎn)生白色菌落。 

X-gal溶液 (20mg/ml)使用說(shuō)明：（僅供參考） 

藍(lán)白色篩選：

 （1）在 100mL 的瓊脂培養(yǎng)基中，加入 500μL 的 X-gal 溶液（20mg/mL）、250μL 的 IPTG 溶液（50mg/mL）和 100μL 的 Amp 溶液（氨芐青丨霉素 100 mg/mL），制作成含 X-Gal、IPTG 和 Amp 的平板培養(yǎng)基。高壓滅菌后的培養(yǎng)基需冷卻至 55℃以下時(shí)加入 X-gal、IPTG 和 Amp，以防失活。

 （2）實(shí)際上 X-gal 和 IPTG 可以直接涂抹在平板培養(yǎng)基表面， 90mM 的平板，X-gal（20mg/mL）涂 40μL，IPTG（50mg/mL）涂 16μL。150mm 的平板加倍，待涂布的液體干后即可使用。細(xì)菌鋪板后，37℃培養(yǎng)過(guò)夜，可根據(jù)長(zhǎng)出菌落的藍(lán)白色，而方便地挑選出基因重組體（白色菌落為具有 DNA插入片段的基因重組體）。

 注意事項(xiàng)：為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。