RNAwait(非凍型組織RNA保存溶液)
RNAwait(非凍型組織RNA保存溶液)
產品說明:
RNAwait是一種無毒的可直接使用的樣品儲存液,能使細胞內的RNA與RNA酶分離,可以快速可靠地保存動物組織、細胞內的RNA。組織獲取后立即浸入RNAwait保存液中,在室溫可以保存7天,4℃可以保存4周,-20℃、-80℃標本可以長期保存,RNA穩定存在不降解,取出后用各類方法抽提可以獲得高質量的RNA。
操作流程:
1. 根據要保存的各樣本的體積,計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應當是組織體積的10倍(如100mg組織約用1ml RNAwait);離心收集2×106細胞RNAwait的用量是1ml。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中;
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀,立即都浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入,組織中間部位的RNA不能受到保護。較小的組織(如大鼠的腎臟、脾臟,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存時先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過夜(4℃過夜是必需的,這樣可使RNAwait都滲入到組織中),然后轉移到-20℃冰箱;或者在4℃冰箱過夜后,從RNAwait中取出組織塊,轉移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的標本,反復凍融至室溫20次不影響RNA的質量。
注意事項:
1. 組織和細胞取材速度要快,在獲取后應當盡快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰凍組織不能用RNAwait保存,因為RNAwait不能有效滲入冰凍組織。
3. 保存樣品的RNA提取:樣本從-20℃或-80℃冰箱取出后,復蘇到室溫后,取出組織塊,再用于提取RNA。細胞樣本則復溫后低速離心收集細胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后繼的處理(如組織勻漿)可以在室溫下進行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保護。殘留少量RNAwait保存液不影響后繼提取RNA的質量。