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薄層色譜法是常用的微量分離技術，以涂在支持板上的支持物作為固定相。使用薄層色譜法進行分離時需要先制作薄層板，色譜的層析過程是在薄層板上進行的，因此薄層板的制作對于分離結果有很大的影響。正確的操作如下：
薄層板的制備
薄層板的制備方法有干法制板和濕法制板。干法制板常用氧化鋁作吸附劑，將氧化鋁倒在玻璃上，取直徑均勻的一根玻璃棒，將兩端用膠布纏好，在玻璃板上滾壓，把吸附劑均勻地鋪
在玻璃板上。這種方法操作簡便，展開快，但是樣品展開點易擴散，制成的薄板不易保存。
實驗室常用的是濕法制板。取2 g硅膠G加入5~7 mL 0.7%的羧甲基纖維素鈉水溶液，調成糊狀。將糊狀硅膠均勻地倒在3塊載玻片上，先用玻璃棒鋪平，再用手輕輕振平。大量鋪板或鋪較大板時，也可使用涂布機。
薄層板制備的好壞直接影響了色譜分離的效果，在制備過程中應注意以下事項：
(1)鋪板時，盡可能將吸附劑鋪均勻，不能有氣泡或顆粒等；
(2)鋪板時，吸附劑的厚度不能太厚也不能太薄，太厚展開時會出現拖尾，太薄樣品分不開，一般厚度為0.5~1 mm；
(3)濕板鋪好后，應放在比較平的地方晾干，即慢慢地自然干燥，千萬不要快速干燥，否則薄層板會出現裂痕。
薄層板的活化
薄層板經過自然干燥后，再放入烘箱中活化，進一步除去水分。不同的吸附劑及配方需要不同的活化條件。例如：硅膠一般在烘箱中逐漸升溫，在105~110℃下烘30 min；氧化鋁在200~220℃下烘4h，可得到活性為Ⅱ級的薄層板，在150~160℃下烘4h，可得到活性為Ⅲ~Ⅵ級的薄層板。活化后的薄層板放在干燥器內保存備用。當分離某些易吸附的化合物時，可不用活化。
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