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分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性或定量分析。常用的波長范圍為：(1)200～380nm的紫外光區，(2)380～780nm的可見光區，(3)2.5～25μm(按波數計為4000cm<-1>～400cm<-1>)的紅外光區。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計
可見分光光度計測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區和波長范圍為200～380 nm的紫外光區。不同的光源都有其*的發射光譜，因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。
可見分光光度計可應用于核酸的定量、蛋白質的直接定量、細菌細胞密度測量等。
核酸的定量
核酸的定量是分光光度計使用頻率最高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波長260 nm。每種核酸的分子構成不一，因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸，事先要選擇對應的系數。
蛋白質的直接定量(UV法)
這種方法是在280nm波長，直接測試蛋白。選擇Warburg 公式，光度計可以直接顯示出樣品的濃度，或者是選擇相應的換算方法，將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單，先測試空白液，然后直接測試蛋白質。
細菌細胞密度(OD 600)
實驗室確定細菌生長密度和生長期，多根據經驗和目測推斷細菌的生長密度。在遇到要求較高的實驗，需要采用分光光度計準確測定細菌細胞密度。OD600是追蹤液體培養物中微生物生長的標準方法。
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