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【中國儀器網 產品文庫】熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發光譜、發射光譜以及熒光壽命、熒光偏振、熒光強度、量子產率等許多物理參數,從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過對這些參數的測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環境下的構象變化, 從而闡明分子結構與功能之間的關系。
熒光分光光度計基本結構
1. 光源：
為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈，后者能發射出強度較大的連續光譜，且在300nm～400nm 范圍內強度幾乎相等，故較常用。
2.檢測器：
一般用光電管或光電倍增管作檢測器。可將光信號放大并轉為電信號。
3. 樣品室：
通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時，光源與檢測器成直角安排；測量固體時，光源與檢測器成銳角安排。
4.發射單色器：
置于樣品室和檢測器之間的為發射單色器或第二單色器，常采用光柵為單色器。篩選出特定的發射光譜。
5.激發單色器：
置于光源和樣品室之間的為激發單色器或*單色器，篩選出特定的激發光譜。
熒光分析的特點：
1.高靈敏度：熒光分析的靈敏度比分光光度計法大 2 ～ 3 個數量級。 分光光度法通常在 10-7 級 ，而熒光的靈敏度達10-9。
2.強選擇性：熒光物質具有2種特征光譜：激發光譜和吸收光譜，分光光度法通過測定物質的吸收光譜來分析，而熒光可根據激發光譜和發射光譜來鑒定物質。
3.信息量豐富：能提供熒光物質的多種參數。
4.不足之處：①很多物質本身不發熒光；②熒光的產生與化合物結構的關系不明確；③干擾因素多，光分解、氧淬滅、易污染。
熒光分析的常用方法：
1.直接測定法：利用物質本身發出的熒光來進行測定。因為大部分物質不發熒光，該法少用。
2.間接測定法：物質本身不發熒光，跟熒光探劑結合后轉變成熒光物質進行測定。
3. 熒光探針探劑的條件：⑴ 探劑與被測物質分子的某一微區必須有特異性結合且牢固；
⑵ 探劑的熒光必須對環境條件靈敏；
⑶ 結合的探劑不會影響被測物質的分子結構和特性；
⑷ 能利用熒光淬滅和光分解等對熒光進行有效定量和定性分析。
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