【儀器網 行業應用】液相色譜法作為一種以液體為流動相,并采用顆粒極細的固定相的柱色譜分離技術,其分離機理一般是根據混合物中各組分對兩相親和力的差別,從而實現物質的分析研究。目前,液相色譜法在食品分析、生物液體、環境分析等各類物質分析領域都有著廣泛的使用。為深入了解液相色譜的原理,以下根據網上資料,對液相色譜的各系統進行簡述:
1.進樣系統:一般液相色譜的進樣系統分為手動進樣閥和自動進樣器。
2.輸液系統:*按輸出液恒定的因素分恒壓泵和恒流泵。其中,*的流量穩定性的保留值是色譜定性的重要依據。此外,*按工作方式分為氣動泵和機械泵兩大類。機械泵中又有螺旋傳動*、單活塞往復泵、雙活塞往復泵和往復式隔膜泵。
3.分離系統:一般液相色譜中分離系統包括色譜柱、保護柱以及柱溫箱。其中,色譜柱是樣品分離的核心,色譜柱使用的pH值范圍、溶劑耐受范圍、壓力范圍和維護方法等事項是操作液相色譜時的重要事項。而保護柱的作用主要是防止吸附性強的雜質對色譜柱污染,從而延長色譜柱的壽命。另外,還有為避免色譜柱溫度變化,導致保留時間出現變化的柱溫。
4.檢測系統:常見液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。其中,紫外檢測器適用于對紫外光或可見光有吸收性能樣品的檢測,不僅能對如蛋白質、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等物質分析進行使用,而且還具有靈敏度高、線性范圍寬、對溫度和流速變化不敏感等優點。而示差折光檢測器,則是專門分析檢測具有與流動相折光率不同的樣品組分。目前,示差折光檢測器具有通用性強、操作簡單等優點。較多應用于糖類化合物的檢測。還有熒光檢測器,則是對具有熒光的物質進行檢測分析的檢測器,其檢測靈敏度高,而且還能進行痕量分析以及梯度洗脫樣品的檢測。
5.數據處理系統:在液相色譜檢測分析后,需要對測試數據進行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作,而數據處理系統便是能助力分離、制備或鑒定樣品的工作等的系統。
由于資料有限,因而上述分析并不全面,若要深入了解液相色譜,建議咨詢相關專業技術人員。
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