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圓二色光譜檢測蛋白質二級構象的操作方法

2020年01月14日 10:24

　　【儀器網使用手冊】圓二色光譜研究蛋白質二級結構、構象變化以及其他手性化合物結構的常用方法，用圓二色光譜檢測蛋白質二級構象的操作方法是研究人員都需要掌握的。下面就簡單介紹一下應該如何操作圓二色光譜儀。

　　1.準備

　　為避免圓二色光譜儀強度隨溫度而發生變化的變化，應安裝在空調室中，而且還需要光源(Xe燈)的冷卻用水(流量為2.0L/min)

　　為了防護由氙燈所產生的臭氧化光學系統的腐蝕,還得需要流動干燥的氮氣(2-5L/min)

　　需要透光率好、應變小的高品質石英玻璃樣品池。

　　2.樣品制備

　　樣品制備需要保證蛋白的純度和透明度，避免含有光吸收的雜質。

　　緩沖液可選擇透明度較高的溶液。

　　3.開機

　　打開高純氮氣，通入光路。打開計算機，進入操作界面，設置相關參數開啟氙燈，等約30 min，待儀器充分預熱后，方可使用。

　　4.測試

　　將光路徑為1 cm的樣品池放入樣品室中，進入測試界面，輸入測試參數：靈敏度1000 mdeg；掃面范圍350-200 nm；掃速50 nm/min；響應時間2s；響應波長寬度1.0 nm；掃描次數1次。先測試蒸餾水背景，再分別測試配制的兩份溶液。然后進行數據處理。

　　5.關機

　　打開樣品室，取出樣品池；退出操作界面，關閉氙燈；關閉氮氣，關閉主機電源；關閉計算機和打印機；清洗樣品池。

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