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現(xiàn)象

可能的原因

解決方法

柱壓升高

色譜柱入口濾片被流動(dòng)相或樣品中顆粒堵住。
樣品組分在濾片上沉淀堵住濾片。

卸下入口接頭的濾片，使用1：1 的硝酸溶液超聲清洗5min，再用水、甲醇清洗除去水份。
樣品及流動(dòng)相使用0．45μm 濾膜除去微量雜質(zhì)。使用流動(dòng)相作溶劑配制樣品。

新柱柱效低

柱外死體積大。
樣品在流動(dòng)相中溶解不好，影響傳質(zhì)過(guò)程。

更換連接管，重新連接色譜柱，降低死體積。
使用合適的流動(dòng)相或使用流動(dòng)相溶解樣品。

舊色譜柱柱效低，分離不好，柱入口床層塌陷。

填料被流動(dòng)相溶蝕而流失。

用同型填料*柱效可部分恢復(fù)。
對(duì)硅膠質(zhì)填料，流動(dòng)相PH 值在2—7 范圍內(nèi)，否則可能被溶蝕。

舊色譜柱柱效低分離不好，有時(shí)出現(xiàn)雙峰

入門(mén)填料被污染變質(zhì)所致。

用強(qiáng)溶劑沖洗。
刮除被污染的床層，用同型的填料*柱效可部分恢復(fù)。
污染嚴(yán)重，則廢棄或重新填裝。

新柱接到儀器上后，柱頭漏液。

柱接頭與儀器之間連接管的壓環(huán)變形量不夠。

用扳手順時(shí)針?lè)较驍Q緊1／4 圈直到不漏液為止。

新柱接到儀器上后，啟動(dòng)儀器沒(méi)有柱壓降。

柱放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)柱內(nèi)充裝的液體己揮發(fā)干。

繼續(xù)開(kāi)泵，用流動(dòng)相將柱內(nèi)氣體置換掉。

新柱接到儀器上后，檢測(cè)器出口不斷有小氣泡出現(xiàn)。

①同上。
② 流動(dòng)相脫氣不*特別是MeOH／H20 體系由于氫鍵作用很容易出現(xiàn)氣泡。

①同上。
②配好流動(dòng)相后一定要進(jìn)行脫氣處理。

新柱接到儀器上后柱壓降不斷增加，甚至超過(guò)儀器的耐壓限。

柱入口濾片被固體顆粒堵塞(或被毒菌堵塞)。

更換或清洗柱入口濾片；用0．45μm 過(guò)濾膜過(guò)濾流動(dòng)相除去微小顆粒物。

進(jìn)樣次數(shù)增加柱壓降逐漸增加。

①樣品中含有不溶于流動(dòng)相的微小顆粒物。
②樣品在流動(dòng)相中析出微小結(jié)晶。

①用0．45μm 過(guò)濾膜過(guò)濾樣品。
②推薦使用流動(dòng)相溶解樣品。

使用—段時(shí)間后，柱效下降，分離不好。

①柱填料被流動(dòng)相溶解而流失。
②柱填料被樣品雜質(zhì)污染。

①推薦使用予柱。如柱床層塌陷，用相同型號(hào)填料*。
②推薦使用保護(hù)柱或用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱除去污染雜質(zhì)。

柱使用一段時(shí)間后，柱效下降出現(xiàn)雙峰。

柱入口床層被污染使柱填料變質(zhì)。

用強(qiáng)溶劑沖洗除去雜質(zhì)。

柱使用—段時(shí)間后，柱效下降，出現(xiàn)峰拖尾。

柱入口床層被污染。

用強(qiáng)溶劑沖洗20-30ml，若效果不明顯應(yīng)廢棄。

進(jìn)樣量增大與峰面積增加不成正比．即進(jìn)樣量與峰面積不是線性關(guān)系。

樣品在流動(dòng)相中的溶解度小，只有部分樣品被流動(dòng)相沖如色譜柱中而另一部分則沉積在柱人口端。

①用流動(dòng)相溶解樣品。
②樣品的濃度不宜太大。
③進(jìn)樣量不宜過(guò)大。

使用緩沖液作流動(dòng)相時(shí)，柱壓降升高很快。

霉菌生長(zhǎng)所致。

①在流動(dòng)相中加入有毒物質(zhì)或加疊氯化鈉防止霉菌生長(zhǎng)。
②實(shí)驗(yàn)結(jié)束后先用純水后用MeOH 各沖洗20-30ml 后關(guān)機(jī)。

用 5μm 顆粒填料柱時(shí)，以MeOH／H20作流動(dòng)相柱壓較高。

MeOH 與水之間由于氫鍵作用黏度增大。

可用乙腈／水體系使柱壓降低，分離效率更好。

長(zhǎng)時(shí)間放置的色譜柱，出現(xiàn)雙峰。

柱床層出現(xiàn)干裂。

柱放置時(shí)，使用相應(yīng)的溶劑充填好，防止受大的機(jī)械震動(dòng)，如床層干裂應(yīng)廢棄掉。

流動(dòng)相洗滌強(qiáng)度由弱漸強(qiáng)時(shí)出現(xiàn)很多雜質(zhì)峰。

強(qiáng)溶劑將弱溶劑洗不出的雜質(zhì)沖出來(lái)。

不影響柱的性能。

柱使用一段時(shí)間后保留值逐漸縮短。

柱中固定相流失所致。

①更換色譜柱。
②檢查所用的色譜條件是否合適。

在UV色譜圖中，靠近死時(shí)間處出現(xiàn)負(fù)峰。

①進(jìn)樣時(shí)壓力波動(dòng)所致。
②樣品溶劑比流動(dòng)相的UV吸收值低。

①采用閥進(jìn)樣。
②用流動(dòng)相溶解樣品。