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甲苯胺藍(lán)染色液(0.5%,硼酸鹽法) 用于細(xì)胞核染色、肥大細(xì)胞染色,規(guī)格為100ml,屬細(xì)胞染色液類(lèi),有效期12個(gè)月.
【信息說(shuō)明】
產(chǎn)品名稱(chēng):甲苯胺藍(lán)染色液(0.5%,硼酸鹽法)
供應(yīng)商:遠(yuǎn)慕染色液廠家
規(guī)格:100ml
分類(lèi):細(xì)胞染色
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月
用途:細(xì)胞核染色、肥大細(xì)胞染色
注意事項(xiàng):硼酸鹽溶液配制,甲苯胺藍(lán)中的陽(yáng)離子與組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)結(jié)合而被染色。染色結(jié)果為:細(xì)胞核呈藍(lán)色,而肥大細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有肝素等異色性物質(zhì)呈異染性紫紅色。
【染色原理】
1、甲苯胺藍(lán)染色液(0.5%,硼酸鹽法)由于硼酸鹽緩沖液呈強(qiáng)堿性,更利于組織細(xì)胞的著色;甲苯胺藍(lán)(Toluidine Blue O)是一種常用的人工合成染料, 屬于醌亞胺染料類(lèi), 這類(lèi)染料主要含有胺基和醌型苯環(huán)兩個(gè)發(fā)色團(tuán),從而成色原顯色。
2、甲苯胺藍(lán)中的陽(yáng)離子有染色作用, 組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽(yáng)離子相結(jié)合而被染色。
3、甲苯胺藍(lán)還含有兩個(gè)助色團(tuán),能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類(lèi);幫助發(fā)色團(tuán)對(duì)組織產(chǎn)生染色力,使切片上的組織細(xì)胞著色,可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色。
4、肥大細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有肝素和組織胺等異色性物質(zhì),遇到甲苯胺藍(lán)可呈異染性紫紅色,臨床上經(jīng)常用于肥大細(xì)胞染色。
【注意事項(xiàng)】
1、針對(duì)于胃粘膜組織、軟骨組織等較難著色組織的染色,浸染于甲苯胺藍(lán)染色液的時(shí)間應(yīng)相應(yīng)延長(zhǎng)。
2、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3、請(qǐng)嚴(yán)格按照甲苯胺藍(lán)染色液(0.5%,硼酸鹽法)說(shuō)明書(shū)上的要求進(jìn)行規(guī)范化操作。
4、如果本品沒(méi)有使用完,請(qǐng)遵循染色液相關(guān)保存方法進(jìn)行完善保存。
【操作步驟】
甲苯胺藍(lán)染色液(0.5%,硼酸鹽法)屬細(xì)胞染色液類(lèi)產(chǎn)品,其他操作步驟主要有以下四點(diǎn)進(jìn)行:
肥大細(xì)胞染色
脫蠟至蒸餾水。
根據(jù)切片厚度和組織的不同,浸染于甲苯胺藍(lán)染色液。
蒸餾水或去離子水輕輕沖洗。
4、冰乙酸分化,直到細(xì)胞核和顆粒清晰可見(jiàn)。
快速和無(wú)水乙醇脫水。
6、 二甲苯透明,封固。
染色結(jié)果:肥大細(xì)胞呈紫紅色;背景呈淡藍(lán)色。
B、軟骨染色
1、 石蠟切片入二甲苯。
2、 系列乙醇各。
3、 自來(lái)水洗。
4、 入Toluidine Blue O Stain,浸染。
5、 自來(lái)水洗,濾紙吸干水分。
6、 丙酮分化至軟骨細(xì)胞呈紫藍(lán)色清楚可見(jiàn)。
7、 逐級(jí)乙醇脫水。
8、 二甲苯透明,中性樹(shù)膠封固。
染色結(jié)果:軟骨、成骨細(xì)胞呈紫紅色;背景呈淡藍(lán)色。
C、細(xì)胞涂片染色
1、用乙醇溶液稀釋甲苯胺藍(lán)染色液, 一般要求稀釋即可。
2、細(xì)胞涂片后,立即放入乙醇中固定,取出放在紙巾上。
3、滴加稀釋后的甲苯胺藍(lán)染色液進(jìn)行滴染,加蓋玻片讓染料滲透到細(xì)胞中。
4、將玻片豎起,稍加壓力,使多余染料被紙巾吸去。
5、無(wú)需干燥,直接鏡檢。
染色結(jié)果:細(xì)胞核、淋巴細(xì)胞呈深藍(lán)色;核仁呈紫紅色;紅細(xì)胞呈橘紅;細(xì)胞質(zhì)、單核細(xì)胞呈淡藍(lán)色。
D、原位雜交染色
1、 用蒸餾水或去離子水稀釋到相應(yīng)的濃度,憑經(jīng)驗(yàn)一般稀釋比例大于1:100。
2、 玻片在稀釋好的染色液中短暫浸泡。
3、 在蒸餾水或去離子水浸泡數(shù)次。
4、 按需求進(jìn)行壓片固定。
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