小鼠B細胞雜交瘤細胞，W6/32

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• 如何選用培養基？ 
  培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，*MEM做粘附細胞培養、RPMI-1640做懸浮細胞培養，各種目的無血清培養的*是AIM V培養基（SFM）。在開始進行新的細胞培養時，可以參考下表所列的條件： 
  細胞系 細胞類型 種 組織 *使用的培養基 

  KG-1 骨髓白細胞 人 紅白血病病人骨髓 IMDM, 20% 胎牛血清 
  L2 上皮細胞 大鼠 肺 F-12K, 10%胎牛血清 
  L6 大鼠 骨骼肌成肌細胞 DMEM, 10% 胎牛血清 
  LLC-WRC 256 上皮細胞 大鼠 癌 Medium 199, 5% 馬血清 
  McCoy 成纖維細胞 小鼠 未知 MEM, 10% 胎牛血清 
  MCF7 上皮細胞 人 乳腺癌 MEM, 10% 胎牛血清 NEAA, 10ug/ml 胰島素 
  WEHI-3b 類巨噬細胞 小鼠 骨髓單核細胞白血病 DMEM, 10% 胎牛血清 
  WI-38 上皮細胞 人 胚胎肺 BME, 10% 胎牛血清 
  WISH 上皮細胞 人 羊膜 BME, 10% 胎牛血清 
  WS1 人 胚胎皮膚 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA 
  XC 上皮細胞 大鼠 肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA 
  Y-1 上皮細胞 小鼠 腎上腺瘤 F-10, 15% 馬血清和 2.5% 胎牛血清 

  COS-1 成纖維細胞 猴 腎 DMEM, 10% 胎牛血清 
  COS-3 成纖維細胞 猴 腎 DMEM, 10% 胎牛血清 
  COS-7 成纖維細胞 猴 腎 DMEM, 10% 胎牛血清 
  CRFK 上皮細胞 貓 腎 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA 
  CV-1 成纖維細胞 猴 腎 MEM, 10% 胎牛血清 
  D-17 上皮細胞 狗 骨肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA 
  Daudi 成淋巴細胞 人 淋巴瘤病人血液 RPMI-1640, 10% 胎牛血清 
  GH1 上皮細胞 大鼠 垂體腫瘤 F-10, 15% 馬血清和 2.5% 胎牛血清 
  GH3 上皮細胞 大鼠 垂體腫瘤 F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清 

• 3T6 成纖維細胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清 
  A549 上皮細胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛血清 
  A9 成纖維細胞 小鼠 結締組織 DMEM, 10%胎牛血清 
  AtT-20 上皮細胞 小鼠 垂體腫瘤 F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清 
  BALB/3T3 成纖維細胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清 
  BHK-21 成纖維細胞 倉鼠 腎 GMEM, 10% 胎牛血清 或MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA 
  BHL-100 上皮細胞 人 乳房 McCoy'5A, 10% 胎牛血清 
  BT 成纖維細胞 牛 鼻甲骨細胞 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA 
  Caco-2 上皮細胞 人 結腸腺癌 MEM, 20% 胎牛血清 和NEAA 

小鼠B細胞雜交瘤細胞，W6/32常見的污染如下：

1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據感染細菌的不同，可有不同的外形，培養液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。

2、霉菌：培養液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質，37度孵箱培養2-3天，仍清亮，但出現絮狀雜質，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態變差，
用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅。或者在培養箱的托盤加入飽和的消毒*高鹽液體,可以防止霉菌污染。

3、支原體：黑色的，好象多為多形，培養液一般培養液一般會渾濁，原體感染，國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。

4、黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。

5、真菌：一般培養液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發現，但是一旦發現有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。

6、原蟲：培養液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養。這種共生是非常普遍的，但他們的數量小，細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長，zui終形成惡性循環。

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