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免疫共沉淀(Co-IP)實驗外包

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免疫共沉淀(Co-IP)實驗其原理是:當細胞在不是變性條件下被裂解時,完整細胞內(nèi)存在的很多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保存了下來。

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免疫共沉淀(Co-IP)實驗

實驗材料:蛋白質試劑、試劑盒:RIPA Buffer  PBS  Protein A  agarose  瓊脂糖  還有考馬斯亮藍染色液

儀器、耗材: 離心機 搖床 EP管 細胞刮子 離心管 培養(yǎng)板 電泳儀 電泳槽 高效液相色譜儀

免疫共沉淀(Co-IP)實驗

實驗步驟

一、試劑準備

1.預冷PBS,RIPA Buffer,細胞刮子(用保鮮膜包好后,埋冰下),離心機。

2.用預冷的PBS洗滌兩次細胞,zui終一次吸干PBS。

3.加入預冷的RIPA Buffer(1 ml/107個細胞、10 cm培養(yǎng)皿或150 cm2培養(yǎng)瓶,0.5 ml/5×106個細胞、6 cm培養(yǎng)皿、75 cm2培養(yǎng)瓶)。

4.用預冷的細胞刮子將細胞從培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶上刮下,把懸液轉到1.5EP管中,4℃,緩慢晃動15 min(EP管插冰上,置水平搖床上)。

免疫共沉淀(Co-IP)實驗

其原理是:當細胞在不是變性條件下被裂解時,完整細胞內(nèi)存在的很多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保存了下來。比如用蛋白質X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內(nèi)結合的蛋白質Y也能沉淀下來。目前多用精制的proreinA預先結合固化在argarose的beads上,使之與含有抗原的溶液及抗體反應后,beads上的proreinA就能吸附抗原達到精制的目的。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內(nèi)結合;也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。

上海劍鈍生物技術有限公司成立于2005年,公司位于上海長江軟件園,實驗室面積600多平方米。公司目前具備*的生物學、醫(yī)學技術服務平臺,能夠為廣大客戶提供醫(yī)學科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務。  我們擁有專業(yè)的實驗室、*的實驗設備和經(jīng)驗豐富的科研技術人員。技術團隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學、轉錄組學、蛋白質組學、代謝組學、生物化學、病理檢測、基因檢測等技術在科研中的應用與推廣。通過高度細分、*的服務平臺,為廣大客戶提供了完善的技術解決方案和服務。目前,協(xié)助發(fā)表的SCI及國家核心期刊上的學術論文達兩千余篇,涉及臨床醫(yī)學、腫瘤生物學、免疫學、細胞生物學、分子生物學等生命科學、醫(yī)學等諸多領域。

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