上海古朵現貨供應兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA檢測試劑盒,中文名:兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA試劑盒,
別名:兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA Kit,規格:48t/96t,保存:2~8℃,有效期:6個月,檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
上海古朵生物詳細介紹兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA檢測試劑盒的信息說明,注意事項及其他咨訊,本司所供應的ELISA試劑盒包含大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒,馬ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,猴ELISA試劑盒,植物ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,其他種屬等,歡迎訂購!
【信息說明】
中文名:兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA試劑盒
別名:兔子神經營養因子3(NT-3)ELISA Kit
供應商:上海古朵
規格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個月
樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
【配制組成】
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、*標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、*標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
【操作步驟】
1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
2、酶標板置4℃,包被過夜。
3、洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
4、陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
5、酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
6、洗板,同(4)。
7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8、酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
9、洗板,同(4)。
10、每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
11、每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
12、分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13、數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
【注意事項】
1、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
2、試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
3、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
4、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
5、洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
6、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7、加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
8、按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
9、底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
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