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中文名：人鈣調磷酸酶（CaN）ELISA試劑盒

別名：人鈣調磷酸酶(CaN)ELISA Kit

供應商：上海古朵

規格：48t/96t

保存溫度：2-8℃
 

人鈣調磷酸酶（CaN）ELISA檢測試劑盒檢測樣品的處理

1.細胞培養物上清：細胞培養物于室溫1000g，離心10分鐘后收集上清，并將標本保存于-20℃，且應避免反復凍融。

2.血清：標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g，4℃離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

3.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑標本采集后30分鐘內于2-8℃，1000g離心15分鐘，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

4.尿液：無菌收集取初尿，離心除去沉淀物，即可用于檢測，要*保存尿樣，可以加入0.05％的NaN3在4-8℃保存，或加入尿樣冰凍保護液放入-20℃冰箱*保存。

5.組織勻漿：將組織標本先用PBS洗滌，除去多余血液，勻漿化后放在PBS于-20℃放置過夜，再經過二次反復凍融破膜，5000g，4℃離心5分鐘，取上清即可檢測。注：取樣和樣品處理過程中，防止有毒物質對操作人員的危害，要采取相應的保護措施。

典型操作流程：

1. 酸性成纖維細胞生長因子1試劑盒，aFGF-1試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

免費代測試劑準備：

試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。

1. 標準品復溶：試劑盒提供6管標準品，每管已標定濃度，并且凍干。實驗前在每個標準品管中加入0.5mL*，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動助其溶解，使其恢復為每個標準品管身標注的濃度。

2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

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