糖酵解系列3磷酸甘油酸激酶PGK測試盒微量法是上海酶聯生物為您精心研發用于實驗方法的生化試劑盒產品，也是您科研路上的好幫手，產品說明資料歡迎您來電索取。

糖酵解系列3磷酸甘油酸激酶PGK測試盒微量法

產品規格 : 100T/96S

測試方法：微量法

產品分類：糖酵解系列

產品品牌：mlBio/酶聯生物

產品包裝：液體盒裝

運輸條件：快遞包郵

應用范圍：僅供科研研究使用

保存條件：低溫避光保存

有效期：６個月

說明書 : 咨詢或電詢客服索取

供應商：上海酶聯生物科技有限公司

注    意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

糖酵解系列3磷酸甘油酸激酶PGK測試盒微量法

測定意義：

3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關鍵酶，廣泛存在于動植物和微生物體內，催化1，3-二磷酸甘油酸轉變為3-磷酸甘油酸，產生1分子ATP，具有影響DNA復制和修補及刺激病毒RNA合成等生物學功能，廣泛應用于藥物靶標設計。

測定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產生1,3-二磷酸甘油酸和ADP，1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸，340nm處的吸光度變化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、研缽、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）。

酶液提取:

① 總 PGK 酶提取:建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,500g 離心 5min,取上清測定。

② 胞漿和葉綠體 PGK 酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液),冰浴勻漿后于 4℃,500g 離心 5min,棄沉淀,取上清在 4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 PGK 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃, 500g 離心 5min,取上清測定葉綠體中 PGK 酶活性。建議測定總 PGK 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的 PGK,則按照步驟②提取粗酶液。

3. 液體:直接檢測。