使用腺病毒轉導可以實現特定基因的表達或沉默。利用該技術,可以獲得許多不同的細胞類型,并且轉導率可以高達100%。然而,潛在的感染機制有一些局限性,因為它需要受體CAR(Coxsackie Adenovirus Receptor)才能啟動。該受體存在于許多人和嚙齒動物細胞上,但并不存在于所有細胞類型中。為了解決這個問題,ibiBoost™腺病毒轉導增強劑有助于將腺病毒顆粒偶聯到細胞膜上,從而更有效地轉導可接近的細胞類型和以前的非易感細胞類型。
ibiBoost™專門開發用于改善腺病毒載體對通常難以轉導的細胞和細胞系的攝取。ibiBoost™試劑是的,因為它基于腺病毒結合肽。由于這個因素,ibiBoost™改變了腺病毒表面,使得所有允許細胞類型的腺病毒攝取得到改善,并且它允許轉導先前不能用于腺病毒轉導的細胞類型。與化學轉導增強劑不同,ibiBoost™沒有毒性作用。如果超過500的高“感染多重性”(MOI)必須應用于特定細胞類型,則特別推薦使用ibi-Boost™。
該方案旨在使用ibiBoost™改善腺病毒顆粒對細胞的攝取。
在實驗前一天,使細胞接種,以便在轉導時達到50-70%的匯合。 根據下表將所需量的ibiBoost™與培養基混合。 添加對應于所需MOI的腺病毒顆粒。 通過輕彈管混合溶液。 在室溫下孵育30分鐘,在搖床上孵育400rpm。 從細胞中取出培養基,并將混合物加入細胞中。 在標準細胞培養條件下孵育細胞4小時。 除去培養基,用緩沖液洗滌細胞兩次,并加入標準體積的培養
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