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染色質(zhì)免疫共沉淀

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染色質(zhì)免疫共沉淀
真核生物的基因組DNA以染色質(zhì)的形式存在,研究蛋白質(zhì)與DNA在染色質(zhì)環(huán)境下的相互作用是闡明真核生物基因表達(dá)機(jī)制的基本途徑。

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 染色質(zhì)免疫共沉淀

真核生物的基因組DNA以染色質(zhì)的形式存在,研究蛋白質(zhì)與DNA在染色質(zhì)環(huán)境下的相互作用是闡明真核生物基因表達(dá)機(jī)制的基本途徑。與傳統(tǒng)的EMSA技術(shù)相比,染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)(CHIP)能真實(shí)完整地反映結(jié)合在DNA序列上的調(diào)控蛋白,是目前研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用的*方法。

                                                                             

 染色質(zhì)免疫共沉淀原理

是在活細(xì)胞狀態(tài)下以甲醛固定蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物,超聲將其隨機(jī)切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段,然后加入目的蛋白抗體,通過抗體沉淀靶蛋白-DNA復(fù)合物,通過洗脫的方法得到富集的靶蛋白-DNA復(fù)合物,特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段,通過對目的片斷的純化與檢測(PCR分析),從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。

                                                       

 染色質(zhì)免疫共沉淀應(yīng)用

1.組蛋白修飾研究

2.轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析

3.藥物開發(fā)研究

4.有絲分裂研究

5.DNA損傷與凋亡分析

 


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