銀染測(cè)驗(yàn)是檢測(cè)聚丙烯酰胺凝膠中的蛋白質(zhì)，是銀離子在堿性pH 環(huán)境下被還原成金屬銀，沉淀在蛋白質(zhì)的表面上顯色的原理。

銀染注意事項(xiàng):

1. 銀染主要出現(xiàn)在膠的表面，用薄膠（0.5-0.75mm）可以提高靈敏度。
2. 對(duì)于考馬斯亮藍(lán)染色的膠，可用甲醇將膠漂洗后，繼續(xù)進(jìn)行染色。乙酸會(huì)干擾染色，因此要確保將凝膠中的乙酸*洗凈。如果凝膠被過(guò)度銀染，可用Rapid Fix脫色，并用考馬斯亮藍(lán)二次染色。
3. 不同蛋白質(zhì)對(duì)該方法的反應(yīng)是不一樣的，尤其是堿性蛋白染色效果差。因此，不宜用該方法測(cè)定不同蛋白的比例。
4. 染色過(guò)程中，緩慢的振蕩是必要的，一般選擇40-60 rpm.
5. 凝膠表面的裂紋多是由于壓力、手印及表面干燥所致，所以全程操作中都應(yīng)帶手套。
6. 凝膠背景呈均一的黑色多是水中的雜質(zhì)引起的，所以溶液的配制應(yīng)使用電導(dǎo)率小于1 μS的去離子水。
7. 如果染色后有呈灰塵或煙霧狀灰色或棕色的沉淀出現(xiàn)在凝膠表面，可能是在幾步漂洗過(guò)程中洗得不夠*，或是染色過(guò)程時(shí)溫度太低。
8. 較深的銀染背景多是丙烯酰胺中的雜質(zhì)所致。
9. 在zui初甲醇洗脫時(shí)就應(yīng)該先除去甘油、尿素、*、Triton X-100和兩性電解質(zhì)這些干擾性物質(zhì)。
10. 室溫操作，溫度的波動(dòng)往往會(huì)干擾染色的效果，恒溫水浴可以解決這個(gè)問(wèn)題。
11. 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)中含有核酸或金屬時(shí)，染色則不會(huì)奏效。改變固定劑和染色之前對(duì)膠進(jìn)行漂洗可以改進(jìn)染色效果。
12. SDS凝膠中的巰基乙醇會(huì)導(dǎo)致在60 KDa或67 KDa處出現(xiàn)兩條水平線。減少巰基乙醇的用量即可避免。
13. 憑借戊二醛預(yù)處理可以使各種蛋白質(zhì)的染色提高40倍。
14. 染色使用的玻璃器皿必須非常干凈，用酸浸泡可以滿足要求。
15. 染色后應(yīng)盡快照相，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，蛋白條帶會(huì)變淺，而背景會(huì)加深